丁二酸发酵罐灭菌方法
在灭菌前，要将发酵罐的六个固定螺帽拧松以出气，其他螺帽应拧紧。灭菌完成后，打开高压锅后立刻拧紧，佩戴手套以防烫伤。酸液瓶不应放入高压锅内灭菌，应将空瓶上的过滤器用锡箔包好，瓶盖拧松出汽。灭菌后去掉锡箔纸作为出汽口。注意与酸瓶相连的硅胶管不可卡死。
由于丁二酸的发酵过程中通常需要用碱调节pH，发酵产物是有机酸盐，另外发酵罐中的不溶性物质（例如死细胞、蛋白等）需要从最终产品中除去。琥珀酸，又名丁二酸，是一种二羧酸，呈无色晶体，味酸，溶于水、乙醇和乙醚，不溶于氯仿、二氯甲烷。
发酵罐进行灭菌的进排气原则是
1、发酵罐进行灭菌的进排气原则是“非进即出”。具体解释如下：进气原则：在灭菌过程中，所有需要进入发酵罐的管道，如果不进入蒸汽，则必须确保有相应的排气措施。这意味着蒸汽应当能够顺畅地通过这些管道，以达到灭菌的目的。排气原则：对于所有可能积聚气体或蒸汽无法通过的管道，必须设置排气口。
2、在进行实罐灭菌时，遵循着严格的进气和排气原则，即“非进即出”。这一原则确保了所有连接发酵罐的管道在灭菌过程中都能够得到有效的处理，避免存在任何未受蒸汽（或二次蒸汽）触及的“死角”。
3、实罐灭菌的进气和排气原则是“非进即出”，即所有进入发酵罐的管道在灭菌过程中如果不进入蒸汽就一定要进行排气，使所有管道都被蒸汽（或二次蒸汽）通过，得以灭菌。不能有既不进气也不排气的管道存在，也可称为死角。
4、在实罐灭菌过程中，必须遵循特定的进气和排气原则，即非进即出。这意味着，所有连接发酵罐的管道在灭菌时，如果无法导入蒸汽，则必须确保能够排出气体。通过确保所有管道都能被蒸汽（或二次蒸汽）覆盖，从而实现对管道的有效灭菌。
5、缓慢往发酵罐内通入蒸汽，同时控制发酵罐的排气阀门，保持罐压在0.11mpa左右，升温至121℃，恒温1小时。保温完毕后，关闭蒸汽阀门，打开尾气装置，从排气口泄罐压，卸压完毕后，保持排气阀门开着。
发酵罐的清洗和灭菌步骤
1、发酵罐的清洗和灭菌步骤通常包括以下几个步骤： 清洗：将发酵罐内的残留物和污垢清除干净。可以使用适当的清洗剂和清水进行清洗，使用高压水枪或刷子清除死角。 消毒：在清洗完后，使用适当的消毒剂如氯化碳酸钠等对发酵罐进行消毒，以杀死其中的细菌和病毒。
2、清洗：先将罐内残留物清除掉，可选择冷水、热水、碱性清洁剂等方法清洗。 冲洗：用清水对罐进行冲洗，将清洗剂、残留物等洗净。 预处理：将罐内装满水，加热到高温，保持一段时间，可使用蒸汽、热水、过氧化氢等。 灭菌：利用杀菌剂、高温、高压等方法，将微生物全部灭杀。
3、首先，打开蒸汽阀S34，微调P32，使得少量蒸汽缓缓流出，持续30分钟后关闭S34和P32。此步骤通过蒸汽灭菌，去除罐内的细菌，为后续操作创造无菌环境。 其次，封闭混合物，调整排气阀A37，同时控制进气阀A36，以维持不锈钢发酵罐内压力在0.05~0.08mpa之间。
4、进行发酵罐操作时，首先需要校正pH电极和溶氧电极以确保准确度。操作流程分为几个关键步骤： 罐体灭菌：根据所需容量，选择适合的灭菌方法。小型发酵罐（5L）可放入大灭菌锅中进行灭菌（115℃，30分钟），而大型发酵罐（10L及以上）则采用蒸汽灭菌（121℃，30min）。
发酵罐的灭菌方式
中小型发酵罐通常更倾向于使用实罐灭菌，因为它是一种简单且成本较低的灭菌方式。 连续灭菌，或称连消，是指在将培养基输送到发酵罐等设备的过程中进行加热、保温和冷却的连续操作。
清洗：先将罐内残留物清除掉，可选择冷水、热水、碱性清洁剂等方法清洗。 冲洗：用清水对罐进行冲洗，将清洗剂、残留物等洗净。 预处理：将罐内装满水，加热到高温，保持一段时间，可使用蒸汽、热水、过氧化氢等。 灭菌：利用杀菌剂、高温、高压等方法，将微生物全部灭杀。
实罐灭菌是中小型发酵罐常采用的一种培养基灭菌方法。连续灭菌（连消）就是将配制好的培养基向发酵罐等培养装置输送的同时进行加热、保温和冷却等灭菌操作过程。 连续灭菌时，培养基能在短时间内加热到保温温度，并能很快被冷却。
消毒：在清洗完后，使用适当的消毒剂如氯化碳酸钠等对发酵罐进行消毒，以杀死其中的细菌和病毒。 冲洗：清洗和消毒后，一定要用清水充分冲洗发酵罐，并确保彻底清除消毒剂残留。 热灭菌：如果需要进行更加严格的消毒措施，可以使用高温蒸汽或热气进行热灭菌。
发酵罐的消毒方式主要有以下几种：蒸汽灭菌：使用高温高压蒸汽对发酵罐进行灭菌，可以彻底杀死细菌、病毒和真菌等微生物。干热灭菌：使用高温干热对发酵罐进行灭菌，可以在较长时间内杀死微生物，适用于一些耐热的设备和材料。
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