引物稀释中水和TE的区别
1、在稀释引物时，使用的溶剂pH值应大于7（TE缓冲液比无菌去离子水更适合），并且溶液需保持无菌。对于真空干燥的DNA，它应该以干膜状或粉末状的形式存在于离心管底部。在打开瓶盖时，请小心以防止物质的丢失。
2、先离心！然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液（约100μM），保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。
3、PCR引物的存放时间取决于其状态和储存条件。引物状态：未经修饰的DNA引物，无论是干粉形式还是存于TE或无核酸酶水中，其稳定性都依赖于储存温度和介质。在-20℃的条件下，干粉引物可以稳定保存2年或更长时间。然而，一旦引物被稀释成液体状态，其保存期限会相对缩短。
4、引物在溶解前，室温状态下都可以长期保存。使用pH5-0的TE缓冲液溶解引物，在-20℃可以保存两个月甚至半年以上，-4℃保存两周一般也没有问题。不建议使用蒸馏水溶解引物，因为有些蒸馏水的pH值比较低（pH4-5），引物在这种条件下不稳定。
5、用TE（或ddH2O）稀释，按引物合成报告单上写的先稀释到100uM（一般有To dissolved into 100uM，add XX ul water...，不过注意一下是1OD的还是一管的，一般指1OD加这么多），作为贮存液。
6、但其中的EDTA可以螯合金属离子，可能对后续的pcr实验有影响（pcr要求离子浓度），其实影响不大，但如果你害怕的话，就用ddH2O溶，用完了冻起来放个半年也没什么问题。如果引物是直接退火连接的话，用TE更好（连接酶要求低离子浓度）。
为什么要稀释引物
1、为了保证PCR反应的准确性和特异性，需要在实验过程中适当稀释引物。引物的稀释倍数可以根据实验要求和引物的浓度进行调整，引物的浓度应该在0.1-1μM之间。在引物的稀释过程中，需要注意使用无菌的纯水或缓冲液进行稀释，避免引物污染和稀释液的影响。
2、要将100倍的引物稀释至1倍，首先需要理解稀释的基本原理。母液是指原液，稀释剂则是用于降低溶液浓度的物质。在这个特定的例子中，假设我们有一份100倍的引物溶液，即每体积中包含100倍的浓度。为了将其稀释至1倍，意味着我们需要将溶液的浓度降低到原浓度的1/100。
3、引物稀释是分子生物学实验中的常见步骤，用于调整引物的浓度，以满足特定实验的要求。在稀释过程中，保持引物的稳定性和活性至关重要。因此，选择适当的溶剂和稀释方法非常重要。在大多数情况下，使用无菌水作为稀释引物的溶剂是安全且有效的选择。进行引物稀释时，需要遵循一些基本原则。
4、影响PCR反应的特异性。如果引物没有进行10倍稀释，可能会影响PCR反应的特异性。引物不稀释10倍会导致引物与模板DNA之间的比例失衡，从而降低PCR反应的特异性。所以在进行PCR实验时，通常需要对引物进行10倍稀释。
5、根本原因应该是RNA纯度不够，导致反转录的cDNA浓度低。稀释之后DNA与引物结合的机会少了，引物自己结合成二聚体.多种原因要逐一排除：先用内参基因检测一下如 β-actin，GAPDH，18s-rRNA这类基因是生物体或者细胞中稳定表达的基因，表达量几乎不变，如果有条带证明反转录没问题。
6、实时荧光定量PCR引物的稀释涉及到摩尔浓度的计算。以100pmol/ul的标准存储浓度为例，将其转换为摩尔浓度，即100pmol/ul = 100μmol/L = 100μM。 计算稀释后的体积，需要知道所需的摩尔数。假设需要96纳摩尔的引物，针对100μM的浓度，计算公式为V = (所需摩尔数) / (摩尔浓度)。
干粉引物稀释的正确方法
重溶：在TE中重溶引物，最终浓度为50~100μM。这样可以确保引物充分溶解，达到合适的浓度后续实验。离心：收到干粉引物后，在开启离心管盖前先进行离心处理。将管子放入离心机中，3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟即可。
先离心！然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液（约100μM），保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。
引物稀释到10um正确步骤如下：首先收到引物后，在开启离心管盖前在3000至4000转每分钟的转速下离心1分钟，以防开盖时引物干粉散失。然后在装有引物的eppendorf管内加入500ul双蒸水，盖上管盖，充分上下振荡5-10分钟，再次在10000转每分钟的转速下离心1分钟。
◆干粉引物溶解稀释方法：收到引物后，在开启离心管盖前在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟，以防开盖时引物干粉散失。引物保存在高浓度的状况下比较稳定。如果对实验的重复性要求较高，合成的OD数较大，建议分装，避免反复冻融。引物一般配制成10-100pmol/uL(umol/L)。
楼主说的是PCR引物么？一般生产商会提供TE缓冲液，用那个溶解为高浓度母液分装（我们实验室用的母液是100uM），冻存在-30度，使用前再用双蒸水稀释一次到使用浓度，这个使用中溶液也是保存在-30度的，但因为每次用都会化开的缘故，最后在几周内用完，分装时算好用量就好了。
一定要。先离心！然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液(约100μM)，保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。
引物稀释2倍怎么稀释?
1、总之，引物稀释2倍可以通过将等量的引物溶液与等量的无菌水混合来实现。在稀释过程中，需要注意保持引物的清洁和无菌，精确计算所需体积和稀释倍数，并储存在适当的条件下。这些步骤和注意事项将有助于确保引物稀释的准确性和可靠性，从而满足实验的需求。
2、生工的报告单上应该有一个加水量，不过那个是每OD的，你对应的加上2倍的无菌水就可以了，然后是100pm的母液，根据实验要求进行进一步的稀释。
3、对于任意PCR引物，稀释至10μM的标准操作是向每100纳摩尔的引物中加入900微升的ddH2O，即10倍稀释。 通常，市售PCR引物的存储浓度为100μM。使用时，应将其稀释十倍至10μM以备PCR反应使用。
4、引物开盖前先离心：4000rpm，30~60s 慢慢打开管盖，加入适量缓冲溶液或水（参见sangon 报告）forward：共2od，加116ul的缓冲液配成100uM的储存液 reverse：共2od，加100ul的缓冲液配成100uM的储存液 盖上盖后充分震荡混匀 工作液：从储存液中吸取10ul稀释至90ulDEPC水成10uM工作液。
5、重溶：在TE中重溶引物，最终浓度为50~100μM。这样可以确保引物充分溶解，达到合适的浓度后续实验。离心：收到干粉引物后，在开启离心管盖前先进行离心处理。将管子放入离心机中，3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟即可。
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