apoE基因敲除小鼠通常写为apoE-/-小鼠,其中的-/-是代表什么?
-/-代表两个等位基因全部敲掉。小鼠作为二倍体生物，其细胞核内的染色体存在同源染色体，这意味着控制某种性状的基因通常有两个等位基因。为了研究某一基因的缺失对小鼠性状的影响，必须将这两个等位基因全部敲除。在基因敲除技术中，-/-表示该基因在小鼠模型中已经被完全删除。
-/-代表：两个等位基因全部敲掉。小鼠是二倍体生物，细胞核内的染色体，存在同源染色体，所以控制某一种性状的基因是两个，即有2个等位基因。要想研究这一个基因的缺失对小鼠性状的影响，必然需要把这2个等位基因全部敲掉。
ApoE小鼠，全称为B129P2-Apoetm1Unc/J，简称ApoE小鼠，用于研究心血管疾病、动脉粥样硬化、脂代谢相关疾病以及ApoE在AD病中的作用。其基因型为Apoetm1Unc，表示载脂蛋白E基因的靶标突变1，位于7号染色体，通过敲除方式实现。小鼠表型异常，三月龄时出现高血脂症状，动脉脂肪堆积。
做基因实验的小鼠。ApoE LKB1（-／-，fl/fl）Lysm-Cre，在APOE背景下巨噬细胞特异性敲除了 LKB1基因的老鼠。ApoE LKB1（-／-，fl/fl）这个老鼠是上述老鼠的对照鼠 由于没有引入巨噬细胞的cre 未造成删除。
什么是基因敲除,什么是基因敲低?
基因敲低与敲除的区别 基因敲低通过RNA干扰技术，如siRNA或shRNA，降低目标基因的表达，部分抑制其功能，主要用于研究基因生物学功能和代谢途径。而基因敲除则采用基因组编辑技术，如CRISPR/CasTALEN或ZFN，直接删除或失活目标基因，使它完全失去功能，适用于深入探究基因作用及疾病机制。
基因的敲低通常在遗传信息流的mRNA阶段进行。科学家通过降解mRNA，下调蛋白质的表达，实现基因功能的暂时抑制。这种方法不直接作用于DNA，仅影响mRNA的翻译过程，因此称为“敲低”。相反，基因敲除则位于遗传信息流的起点，即DNA。
基因的敲低和敲除操作分别作用于遗传信息流的不同位置。基因的敲低通常通过降解mRNA，减少蛋白质表达，不影响DNA转录。基因的敲除则在DNA层面，通过突变等手段使目标基因无法正常表达。基因敲入则是将一个基因片段插入细胞基因组，改变原有基因功能。
基因敲除的介绍
基因敲除（knockout）是指通过一定的技术方法使机体特定的基因失活或者缺失的技术。针对某个序列已知但功能未知的序列，改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失作用，从而使部分功能被屏蔽，并可进一步对生物体造成影响。
基因敲除（Knock-out）Cas9可以对靶基因组进行剪切，形成DNA的双链断裂。在通常情况下，细胞会采用高效的非同源末端连接方式（NHEJ）对断裂的DNA进行修复。但是，在修复过程中通常会发生碱基插入或缺失的错配现象，造成移码突变，使靶标基因失去功能，从而实现基因敲除。
诱导型条件性基因敲除是一种精细的生物工程技术，主要基于Cre-loxP系统，通过精确调控基因的表达来实现对目标基因在特定时间和空间上的敲除。这种策略的关键在于设计和利用特定的基因工具，如flox小鼠和组织特异性Cre表达。首先，科学家会在目标基因的两端插入Loxp序列，培育出flox小鼠。
具体介绍：基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。
基因敲除作为一种新型分子生物学技术，自80年代末发展起来，其核心是通过特定途径使特定基因失活或缺失，实现对生物体特定基因功能的研究。传统意义上的基因敲除主要依赖DNA同源重组原理，将目的基因替换为外源DNA序列，如筛选基因新霉素，以生成在发育全过程中所有组织和细胞中均不表达该基因的小鼠模型。
为什么当个基因敲除,会引起大量基因的点突变
当使用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除时，往往会引起一些非预期的点突变。这些点突变可能发生在靶基因以外的位置，造成基因表达异常或功能障碍。具体来说，CRISPR/Cas9系统通过向导RNA（gRNA）引导Cas9核酸酶识别并切割特定的DNA序列，从而实现对目标基因的敲除。
敲除：在外显子上设计gRNA引导cas9切割，造成双链断裂，当缺失的碱基数为3的倍数，修复后可发生移码突变 敲入：gRNA和cas9复合物造成靶位点DNA双链断裂后，细胞以外源携带敲入片段的DONOR作为模板进行同源重组修复（HDR），将敲入片段重组到基因组靶点。
基因敲除，是一种基因打靶技术，原理类似于基因的同源重组。具体来说，是将外源DNA插入到目标细胞的基因组中，其序列需与受体细胞内的基因相匹配或相似，通过同源重组的方式替换原有的基因片段。这种技术的优势在于能够产生精准的基因突变，或者修复机体内的基因异常，实现基因的精确调控。
什么是完全基因敲除和条件性基因敲除
1、完全基因敲除是把相关基因全部敲出，而条件性基因敲除是按照要求来敲除实验动物的基因。基因敲除和基因嵌入技术是上个世纪90年代出现的最新外源DNA导入技术。基因敲除是基因打靶技术的一种，类似于基因的同源重组。
2、基因敲除技术分为两种：完全基因敲除和条件型基因敲除。前者是通过同源重组法，彻底消除细胞或动物个体中特定基因的活性。而条件型基因敲除则能够实现特定时间和空间的基因敲除，通过定位重组系统来实现。
3、基因敲除（knockout）是指通过一定的技术方法使机体特定的基因失活或者缺失的技术。针对某个序列已知但功能未知的序列，改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失作用，从而使部分功能被屏蔽，并可进一步对生物体造成影响。
4、基因敲除技术是一种在分子生物学领域广泛应用的基因操作技术，旨在通过精准的基因修饰手段，达到研究基因功能、疾病机理和开发治疗方案的目的。基因敲除主要分为两种类型：完全基因敲除和条件型基因敲除。在完全基因敲除技术中，CRISPR/Cas9系统扮演着核心角色。
5、基因敲除，又称基因打靶，是一种利用外源DNA与染色体DNA之间的同源重组，实现精确定点修饰和基因改造的技术。这项技术具有高度专一性，能够确保染色体DNA与目的片段共同稳定遗传。通过这种方式，科学家可以精确地改变特定基因的功能，从而进行深入的生物学研究。
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